মাইক্রোবায়োলজি প্রফের ভাইবা। আশিক এমনিতেই মাইক্রোবায়োলজি ভয় পায়। তার উপর লকডাউনের বন্ধেও খুব একটা পড়াশুনা হয় নি। লকডাউনে কাজ বলতে সারাদিন মুভি দেখা, গেমস খেলা আর মোবাইলে মাঝেমাঝে Platform-CME এর Content গুলা পড়া।
আশিক সালাম দিয়ে প্রবেশ করলো ভাইবা বোর্ডে। আগের জনের ভাইবা ভালো হয় নি বিধায় এক্সটার্নাল স্যারেরও মেজাজ তুঙ্গে।
রুমে যাওয়ার পর গম্ভীর স্বরে এক্সটার্নাল স্যার বললেন, ” বসো। বন্ধে তো পড়াশুনা করো নি মনে হয়। সারাদিন ত শুধু মোবাইল নিয়ে বসে থাকা, মুভি দেখা আর গেমস খেলা। ”
পরিবেশ হালকা করার জন্য ইন্টার্নাল স্যার বললেন, আশিক বাবা তুমি “হাজার বছর ধরে” উপন্যাসটা পড়েছো?
আশিক- জ্বী স্যার, পড়েছি।
স্যার- আচ্ছা বাবা। এবার তাহলে বলো তো, উপন্যাসে ” ওলা বিবি” কোন রোগ নিয়ে আসে?
আশিক- স্যার, Cholera
স্যার- তো বাবা, বলো তো Cholera- র Pathogen এর নাম কি?
আশিক- স্যার, Vibrio Cholerae.
ইন্টার্নাল স্যার এবার এক্সটার্নাল স্যারকে বললেন, ” স্যার, ছেলেটা পড়ে এসেছে। এবার আপনি যাচাই করেন।”
আশিকও মনে মনে সাহস পেয়ে গেছে কারন V. Cholerae ভালোই পড়ে এসেছে সে।
ইন্টার্নাল স্যার গম্ভীর গলায় জিজ্ঞাস করলেন, তো বলো দেখি V. Cholerae র properties কি কি আছে?
আশিক- স্যার,. Vibrios are curved, comma-shaped, gram negative rods.
- are actively motile with single polar flagellua.
- They are facultative anaerobes & oxidase positive.
- They can grow in alkaline pH.
স্যার- আচ্ছা, এবার তাহলে Vibrio -র Classification টা বলে ফেলো।
আশিক- স্যার, Vibrio species কে শুরুতেই দুইটা ভাগে ভাগ করা যায়-
- Non- halophilic : যারা NaCl যুক্ত media তে grow করতে পারে না। যেমন- V. Cholerae.
- Halophillic (Marine) : যারা NaCl যুক্ত media তে grow করতে পারে। যেমন- V. parahaemolyticus, V. mimicus, V. vulnificus.
স্যার- আচ্ছা, তারপর?
আশিক- স্যার, এরপর Non- halophillic অর্থাৎ V. cholerae কে Cell wall antigen- O এর উপর basis করে দুইটা serogroup আছে- - V. cholerae O-1
- V. cholerae non O-1.
- স্যার- আচ্ছা, এরপর বলো।
আশিক- স্যার, V. cholerae O-1 এর আবার দুইটা Biotype আছে-
1.Classical
2.El- Tor.
এই দুই Biotype এর serotype হলো Inaba, Ogawa ও Hikojima.
স্যার- Good. আচ্ছা, V. cholerae Enteric tract বা colon এ disease করলেও একে Enterobacteriaceae এর member হিসেবে include করা হয় না কেনো?
আশিক- কারণ - V. cholerae curved rod হলেও Enterobacteriaceae গুলো straight rod.
- V. cholerae oxidase positive হলেও Enterobacteriaceae oxidase negative.
- V. Cholerae-র single polar flagella থাকলেও Enterobacteriaceae – র থাকে preitrichus flagella.
স্যার- এবার বলো Virulance factor কি কি আছে?
আশিক- স্যার, Virulance factor গুলো হলো-
- Enterotoxin called Choleragen toxin
- Toxin-coregulated pilus
- Mucinase enzyme যা gastroenteric cell এর mucous coating কে dissolve করে।
স্যার- আচ্ছা, ধরো কাউকে Laboratory থেকে Choleragen toxin খাবারের সাথে mixed করে খাওয়ানো হলো। তার কিছু হবে কি?
আশিক- জ্বী স্যার। সেক্ষেত্রেও Cholera হবে কারন Choleragen toxin টি এতোই toxic যে organism এর absence এও disease করতে পারে।
ইন্টার্নাল স্যার তো অনেক খুশি। এক্সটার্নাল স্যারকে বলতেছেন, “স্যার, দেখছেন তো ছেলে খুব ভালো পড়ে আসছে। ক্লাসে যেভাবে যেভাবে পড়াইছি ঠিক সেভাবেই বলতেছে। সোনার টুকরো ছেলে। এখন দেখবেন Pathogenesis ও কি সুন্দর করে বলে ফেলবে।” আশিক বাবা Pathogenesis টা বলে ফেলো তো-
আশিক- জ্বী স্যার। বলতেছি।
প্রথমেই Ingestion of fecal contaminated water & food with Vibrio Cholerae ( at least 10⁸ V. cholerae) তারপর Organism stomach এর Acid barrier pass করে Small intestine এর Alkaline environment এ আসবে। সেখানে Mucinase enzyme secreteকরে যা Intestinal wall এর Protective glycoprotien coat কে dissolve করবে।
এরপর Organism টি Gut এর Brush border’s cell এর সাথে adhere করে multiplication করবে এবং Enterotoxin অর্থাৎ Chloleragen secrete করবে।
স্যার,Choleragen এর দুইটা subunit আছে- A subunit for action এবং B subunit for binding.
এই Subunit B Enterocyte এর ganglioside receptor এর সাথে bind করবে এবং Subunit A enter into the cell.
স্যার- আচ্ছা, এরপর কি হবে?
আশিক- স্যার, এরপরে Adenylate cyclase enzyme এর persistent stimulation হবে এবং Cyclic AMP এর overproduction হবে। এতে করে Cl⁻, HCO₃⁻, K⁺, H₂O এর secretion বাড়বে।
Ultimately, Massive watery diarrhoea and vomiting হবে।
স্যার- আচ্ছা, ” হাজার বছর ধরে” – উপন্যাসে তো Cholera epidemic হয়েছিলো সেক্ষেত্রে Diagnosis এর জন্য কি করবো?
আশিক- স্যার, Epidemic area তে আমরা মূলত Clinically Diagnose করবো। যেমন- Non bloody rice water stool, no abdominal pain, marked dehydration, vomiting.
স্যার- আর যদি Laboratory তে Diagnose করতে চাই?
আশিক- স্যার, এক্ষেত্রে Specimen হিসেবে নিবো – Stool, Rectal swab, vomit.
Microscopic examination এ যা যা পাবো-
- Gram staining এ gram negative comma shaped bacilli পাবো।
- Hanging drop preparation এ typical motility (darting type) পাবো যাকে বলে ‘a fish in stream’ appearance.
- Dark ground illumination এ shooting star in dark sky appearance পাবো।
এরপর স্যার Isolation and Culture করবো।
Culture এর ক্ষেত্রে Optimum temperature : 37⁰C,
pH (8.5 to 9.5; optimum 8.2), Transport media হিসেবে Alkaline peptone water media ব্যবহার করি আমরা এবং Culture এর জন্য Mac Conkey’s agar media, Monsur’s media, Thiosulphate-Citrate-Bile-Sucrose agar ( TCBS agar) media ব্যবহার করি আমরা।
স্যার- তো বিভিন্ন Media তে Finding গুলো বলো?
আশিক- Finding গুলো হলো,
- Mac Conkey’s agar media- Colorless colony ( কারন V. cholerae lactose ferment করে না)
- Monsur’s Media– Small black colonies surrounded by characteristic hollows.
- TCBS agar– Large yellow coloured colony.
স্যার- Good. আচ্ছা, কোনো Biochemical, Serological test আছে কি?
আশিক- স্যার,Biochemical test এ Oxidase positive পাবো। এছাড়াও TSI agar এ Acid slant ও Acid butt পাবো তবে কোনো gas/H₂S পাওয়া যাবে না কারন Organism টি Sucrose ferment করে। Cholera red reaction এর ক্ষেত্রেও V. cholerae positive result দেয়
আর Serological test এ আমরা Slide agglutination করতে পারি।
ইন্টার্নাল স্যার এবার এক্সটার্নাল স্যারকে বললেম, “আশিক তো খুব ভালোই ভাইবা দিলো। এবার তাহলে ভালো মার্ক দিয়ে পরেরজনকে ডাকি, কি বলেন স্যার?”
এক্সটার্নাল স্যার- ঠিকাছে এটাই Last question. এটা পারলে খুব ভালো নাম্বার দিবো। আচ্ছা,বাবা বলো তো কোন Strain টা Bangladesh এ epidemic করছিলো এবং Classical ও El Tor কে কিভাবে distinguish করতে পারি।
আশিক- স্যার, Vibrio cholerae O-139 Bengal ১৯৯২ সালে বাংলাদেশে Epidemic করেছিলো।
স্যার- আর Distinguishing features গুলো বলো তাহলে?
আশিক – স্যার, Feature গুলো তো (মনে মনে ভালো নাম্বার গেলো আজকে)
স্যার- আচ্ছা, সমস্যা নাই আমিই বলে দিচ্ছি শুনো-
- Classical Cholerae গুলো Sheep RBC haemolysis করলেও El Tor তা করে না।
- Classical Cholerae গুলো Chick RBC Haemagglutinate করলেও El Tor তা করে না।
- Classical Cholerae গুলো Phage sensitive হলেও El Tor তা নয়।
আচ্ছা, বাবা যাও। তুমি খুব ভালো ভাইবা দিয়েছো। ভালো নাম্বার ই দিবো। পরের জনকে আসতে বলো।
আশিক মনে মনে আলহামদুলিল্লাহ্ বলে সালাম দিয়ে বের হয়ে পড়লো।
আশিক বাইরে আসতেই তার বন্ধুরা ঘিরে ধরলো, ” কি রে কি কি ধরলো?”
আশিক হাসি হাসি মুখে বললো, ” আরেহ যা যা ধরছে সব ই সহজ সব পারবি। তোরা তো Platform – CME ” এর লিখা গুলো নিয়মিত পড়তি ই। “
Reference –
- Lange’s Review of Medical Microbiology & Immunology (15th Edition) – Chapter 18
- A Textbook of Microbiology by P Chakraborty- Chapter 34
Platform Academic :
Firdaus Alam
President Abdul Hamid Medical College, Session : 2016-17